ZBP1的Zα結構域能夠結合Z-DNA，作者針對這一區域，使用SELEX技術篩選出了一系列靶向ZBP1的核酸適配體，通過SPR篩選出其中與ZBP1親和力最高的Z3，二者的解離常數為2.71 nM，其結合強于Z-DNA與ZBP1的結合。基于此，作者設計的共價PROTAC(C-PROTAC)包括Z3核酸適配體、靶向E3泛素連接酶的VHL配體、linker、與ZBP1上的親核性基團共價反應的NASA基團。
作者首先證實了C-PROTAC能夠有效降低CBL0137誘導的ZBP1水平，降解效果強于相應的不含NASA基團的PROTAC。蛋白酶體抑制劑MG132顯著抑制了C-PROTAC對ZBP1的降解作用，證實該途徑是依賴于蛋白酶體的。此外，C-PROTAC的加入降低了MLKL和RIPK3的磷酸化水平，而Caspase-8的含量沒有明顯變化，表明C-PROTAC特異性針對壞死通路發揮作用，而對凋亡通路不存在顯著影響。
之后，作者評估了C-PROTAC的治療效果。將細胞感染H1N1后，C-PROTAC的治療顯著提高了存活率，一系列炎癥因子，如IL-18、IL-1β等的表達水平也受到抑制。作者也將C-PROTAC進行脂質體包裝，并注射到感染病毒的小鼠中。結果表明，C-PROTAC治療提高了小鼠的存活率，減緩了炎癥細胞在肺組織中的浸潤，也降低了肺組織中細胞的死亡率。
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總之，作者發展了靶向ZBP1的共價PROTAC分子，可以用于治療病毒感染引起的炎癥反應。
本文作者：YAQ
責任編輯：LYC
DOI：10.1002/anie.202423524
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