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Angew. Chem. :近紅外光編程的miRNA放大器用于體內(nèi)早期腫瘤成像2023-12-31
臨床影像學(xué)技術(shù)可以有效評(píng)估腫瘤體積大小,然而欠缺分子生物學(xué)層面的靈敏度。在產(chǎn)生大小和形態(tài)變化之前,腫瘤的發(fā)生往往伴隨著生物分子的異常表達(dá),而現(xiàn)有常規(guī)的檢測(cè)方法,如活檢等,又需要侵襲性采樣過程。因此,原位活體成像低含量生物標(biāo)志物對(duì)于癌癥的早期檢測(cè)具有重要意義。

MiRNA是一類內(nèi)源性、非蛋白質(zhì)編碼的單鏈RNA小分子,其異常表達(dá)與腫瘤的形成、侵襲和遷移密切相關(guān),這使miRNA成為癌癥早期診斷的生物標(biāo)志物。目前報(bào)道的miRNA光學(xué)探針成像窗口多在可見光區(qū),具有較高自體熒光背景信號(hào)以及有限的組織穿透深度,從而限制其在活體成像中的應(yīng)用。稀土納米顆粒具有明亮的近紅外二區(qū)熒光,是活體成像的優(yōu)秀工具。然而,由于稀土納米顆粒無法與信號(hào)放大策略,特別是可控的信號(hào)放大策略相結(jié)合,從而限制了其在低表達(dá)生物標(biāo)志物成像中的應(yīng)用。

近日,南京大學(xué)劉穎教授課題組將可激活的DNA步行者信號(hào)放大策略與稀土納米材料相結(jié)合,設(shè)計(jì)了一種近紅外光編程的miRNA放大器用于早期腫瘤活體原位成像,該策略比直接監(jiān)測(cè)腫瘤體積變化的方法具有更高的靈敏度。

 

 

 

 

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DNA步行者組合由一條miRNA響應(yīng)的DNAzyme行走鏈和多條修飾有近紅外二區(qū)吸收染料FD1080的DNA底物鏈構(gòu)成,被修飾在稀土納米材料上。FD1080猝滅了稀土納米材料在808nm激發(fā)下的1060nm下轉(zhuǎn)換發(fā)光。DNAzyme行走鏈上的miRNA識(shí)別區(qū)域被一段光響應(yīng)的封閉鏈保護(hù),以避免DNA步行者組合在體循環(huán)過程中被激活產(chǎn)生 “假陽性”信號(hào)。當(dāng)探針到達(dá)腫瘤部位,980nm激發(fā)稀土納米材料上轉(zhuǎn)換紫外發(fā)光釋放保護(hù)鏈,恢復(fù)DNAzyme 行走鏈識(shí)別miRNA,連續(xù)切割底物鏈實(shí)現(xiàn)了稀土納米材料近紅外二區(qū)1060nm發(fā)光的恢復(fù)與放大,從而實(shí)現(xiàn)早期腫瘤內(nèi)低含量的miRNA成像。

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NIR-II區(qū)細(xì)胞成像結(jié)果表明,不含有光響應(yīng)保護(hù)鏈的DNA步行者納米機(jī)器(AA-DNA nanomachine)會(huì)被非特異性激活,產(chǎn)生“假陽性信號(hào)”。反之,含有光響應(yīng)保護(hù)鏈的DNA步行者納米機(jī)器(DNA nanomachine)可以有效避免體循環(huán)過程中的非特異性激活與“假陽性信號(hào)”產(chǎn)生。DNA步行者納米機(jī)器能夠有效評(píng)估不同細(xì)胞系中miRNA相對(duì)表達(dá)量,信號(hào)強(qiáng)度趨勢(shì)與qRT-PCR結(jié)果相吻合,表明DNA納米機(jī)器在細(xì)胞內(nèi)miRNA精準(zhǔn)成像方面具有很大的應(yīng)用潛力。

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DNA步行者納米機(jī)器在早期乳腺癌模型中表現(xiàn)出明顯的熒光恢復(fù),比MRI成像更早檢測(cè)出了早期腫瘤的發(fā)生,展現(xiàn)了近紅外二區(qū)DNA步行者納米機(jī)器在早期腫瘤成像中的潛在應(yīng)用前景。該工作為體內(nèi)低含量生物標(biāo)志物成像和早期腫瘤診斷提供了一種新策略。

文信息

A NIR Programmable In Vivo miRNA Magnifier for NIR-II Imaging of Early Stage Cancer

Caixia Wang,?Yuxin Xie,?Xuefang Song,?Zhicong Chao,?Kun Wu,?Yanyun Fang,?Hongxia Zhao,?Prof. Huangxian Ju,?Prof. Ying Liu

文章的第一作者是南京大學(xué)的博士生王彩霞和碩士生解宇欣。

Angewandte Chemie International Edition

DOI:?10.1002/anie.202312665

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