BGC?muf促進生物膜的產生。根據生信分析將先前收集的變形鏈球菌菌株分為8組，以葡萄糖作為碳源時第一組菌株中如Smu56和Smu57具有較強的生物膜形成能力（圖1）。
第一組菌株同時含有BGC1和BGC2，在Smu56和Smu57中進行基因敲除以探究這兩個BGC在生物膜形成中的可能作用。BGC1（muf）的敲除導致形成具有松散的海綿狀結構的異常生物膜（圖2a）。此外Δmuf突變體形成的生物膜可以通過輕搖去除（圖2b）。Δmuf突變體在牙齒表面形成的生物膜顯著減少（圖2c），綜上BGC?muf在生物膜形成中發揮重要作用。
BGC?muf通過增加細菌細胞表面疏水性從而促進粘附。水的接觸角（θW）可以反映細菌的疏水性，數值越高疏水性越強。結果表明第一組菌株表面更加疏水，3個Δmuf突變體θW值均降低，說明BGC?muf與細菌細胞表面疏水性相關（圖3a）。細胞之間的相互作用強于每個細胞與水的相互作用，因此細菌細胞易于聚集被認為是疏水的。隨后作者測定細胞表面張力參數和界面相互作用能，進一步證實細胞表面疏水性的增加促進粘附（圖3b-c）。
鑒定muf代謝產物并解析生合成途徑。接下來作者鑒定muf編碼的代謝產物mutanofactin?1-5。NRPS/ PKS雜合途徑負責mutanofactin的生物合成（圖4）。
除了生合成關鍵酶NRPS-PKSs外，BGC?muf還編碼MufA?（4'-磷酸泛肽基轉移酶PPT），MufB（II型硫酯酶TE），MufC（轉錄調節因子）和MufH，-I和-J（ABC轉運蛋白）（圖4a）。ΔmufB和ΔmufC均降低5的產生，ΔmufHIJ較少損失5，表明MufH，-I和-J負責向細胞運輸5（圖5a）。5以濃度依賴的方式影響生物膜的形成和細菌的聚集（圖5b-c）。將5添加到Δmuf突變體的回補實驗表明以濃度依賴方式恢復生物膜的形成（圖2a,?c,?圖5d）。此外5促進了相關缺乏muf?BGC樣品中生物膜的形成（圖5e，f）。
一些小分子次級代謝產物，例如綠膿素，可與eDNA結合并促進eDNA介導的生物膜形成。有鑒于此，作者提出5促進生物膜形成的機制：經過生物合成并從鏈球菌分泌后，5與自身和鄰近的鏈球菌結合，在細菌細胞周圍形成表面層。疏水層增加細菌細胞表面疏水性，促進粘附以及隨后的生物膜形成和生長。此外，5直接與eDNA結合并促進eDNA介導的細胞聚集和生物膜形成（圖6）。
總之，本文作者發現NRPS/ PKS雜合途徑生物合成的mutanofactin通過增加細菌的疏水性促進生物膜的形成。本文突顯微生物次生代謝介導齲齒發展相關過程的重要性，為齲病的產生、預防和治療相關研究提供參考。
